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人類原巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞(B類) 細(xì)胞株

更新時間:2018-03-23點擊次數(shù):554

 

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人類原巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞(B類)

人類原巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞(B類)|細(xì)胞株

 

人類原巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞(B類) 【培養(yǎng)指南】

對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 

人類原巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞(B類) 【細(xì)胞凍存】

待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行293/HEK-293細(xì)胞|細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

 

人類原巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞(B類) 【復(fù)蘇的原則】

快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使人類原巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞(B類)|細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對細(xì)胞造成損害。

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人類原巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞(B類) 【注意事項】

拜力生物實驗室專業(yè)人士提醒廣大科研實驗者,購買人類原巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞(B類)培養(yǎng),注意事項:

1. 收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。

2. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

 

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